TESTIN YHTEENVETO JA SELITYS
Malaria on hyttysten levittämä, hemolyyttinen, kuumetauti, joka saastuttaa yli 200 miljoonaa ihmistä ja tappaa yli miljoona ihmistä vuodessa.Sen aiheuttaa neljä Plasmodium-lajia: P. falciparum, P. vivax, P. ovale ja P. malariae.Kaikki nämä plasmodiat infektoivat ja tuhoavat ihmisen punasoluja aiheuttaen vilunväristyksiä, kuumetta, anemiaa ja splenomegaliaa.P. falciparum aiheuttaa vakavampia sairauksia kuin muut plasmodiaaliset lajit ja aiheuttaa suurimman osan malariakuolemista.P. falciparum ja P. vivax ovat yleisimmät patogeenit, mutta lajien levinneisyydessä on huomattavaa maantieteellistä vaihtelua.
Perinteisesti malaria diagnosoidaan osoittamalla organismit Giemsa-värjäytyneille perifeerisen veren paksuille sipulille, ja eri plasmodiumlajit erottuvat niiden esiintymisestä tartunnan saaneissa punasoluissa1.Tekniikka pystyy tarkan ja luotettavan diagnoosin tekemiseen, mutta vain silloin, kun sen tekevät ammattitaitoiset mikroskoopit määriteltyjä protokollia käyttäen2, mikä muodostaa suuria esteitä maailman syrjäisille ja köyhille alueille.
Malaria Pf / Pan Antigen Rapid Test Kit on kehitetty ratkaisemaan nämä esteet.Testissä käytetään paria monoklonaalisia ja polyklonaalisia vasta-aineita P. falciparum -spesifiselle proteiinille, Histidine Repeat Protein II (pHRP-II) ja paria monoklonaalisia vasta-aineita plasmodium Lactate Dehydrogenase (pLDH) -proteiinille, plasmodium-laktaattidehydrogenaasille (pLDH), joka on kolmen plasmodiumin kolmen lajin tuottama proteiini, mikä mahdollistaa minkä tahansa muun P. plasmodia.Sen voi suorittaa kouluttamaton tai vähän koulutettu henkilökunta ilman laboratoriolaitteita.
PERIAATE
Pf/Pan Malaria Rapid Test Kit on lateraalivirtauskromatografinen immunomääritys.Testiliuskan komponentit koostuvat: 1) viininpunaisen värisestä konjugaattityynystä, joka sisältää hiiren anti-pHRP-II-vasta-ainetta, joka on konjugoitu kolloidikullan kanssa (pHRP II-kultakonjugaatit) ja hiiren anti-pLDH-vasta-ainetta, joka on konjugoitu kolloidikullan kanssa (pLDH-kultakonjugaatit),
2) nitroselluloosakalvoliuska, joka sisältää kaksi testinauhaa (Pan- ja Pv-nauhat) ja kontrollinauhan (C-vyöhyke).Pan-vyöhyke on esipäällystetty monoklonaalisella anti-pLDH-vasta-aineella, jolla voidaan havaita infektio millä tahansa neljästä plasmodialajista, Pf-vyöhyke on esipäällystetty polyklonaalisilla anti-pHRP-II-vasta-aineilla Pf-infektion havaitsemiseksi ja C-vyöhyke on päällystetty vuohen anti-hiiri-IgG:llä.
Määrityksen aikana riittävä tilavuus verinäytettä annostellaan testikasetin näytekaivoon (S), puskurikuoppaan (B) lisätään lyysipuskuria.Puskuri sisältää pesuainetta, joka hajottaa punasolut ja vapauttaa erilaisia plasmodium-antigeenejä, jotka kulkeutuvat kapillaarivaikutuksella kasetissa olevan liuskan läpi.Jos pHRP-II on läsnä näytteessä, se sitoutuu pHRP II-kultakonjugaatteihin.Immunokompleksi vangitaan sitten kalvolle esipäällystetyillä anti-pHRPII-vasta-aineilla, jolloin muodostuu viininpunainen Pf-nauha, joka osoittaa Pf-positiivisen testituloksen.Jos pLDH on läsnä näytteessä, se sitoutuu pLDH-kultakonjugaatteihin.Immunokompleksi vangitaan sitten kalvolle esipäällystetyllä anti-pLDH-vasta-aineella muodostaen viininpunaisen Pan-vyöhykkeen, joka osoittaa plasmodiumpositiivisen testituloksen.Pan-vyöhykkeen puuttuessa voidaan suositella positiivista testitulosta mille tahansa muulle kolmelle plasmodialle.
Testivyöhykkeiden (Pan ja Pf) puuttuminen viittaa negatiiviseen tulokseen.Testi sisältää sisäisen kontrollin (C-vyöhyke), jossa tulisi olla viininpunainen vyöhyke immunokompleksista, joka koostuu vuohen anti-hiiri-IgG:stä / hiiren IgG:stä (pHRP-II- ja pLDH-kultakonjugaatit) riippumatta värin kehittymisestä missä tahansa testivyöhykkeessä.Muussa tapauksessa testitulos on virheellinen ja näyte on testattava uudelleen toisella laitteella.
