TESTIN YHTEENVETO JA SELITYS
Chikungunya on harvinainen virusinfektio, joka välittyy tartunnan saaneen Aedes aegypti -hyttysen puremasta.Sille on ominaista ihottuma, kuume ja vaikea nivelkipu (artralgiat), jotka kestävät yleensä kolmesta seitsemään päivää.Nimi on johdettu sanasta Makonde, joka tarkoittaa "se, joka kumartuu" viitaten taudin niveltulehduksen oireiden seurauksena syntyneeseen taipuneeseen asentoon.Se tapahtuu sadekauden aikana
maailman trooppisilla alueilla, pääasiassa Afrikassa, Kaakkois-Aasiassa, Etelä-Intiassa ja Pakistanissa.Oireet ovat useimmiten kliinisesti erottamattomia denguekuumeessa havaituista.Intiassa on todellakin raportoitu kaksoisinfektiosta, denguekuumesta ja chikungunyasta.Toisin kuin denguekuume, verenvuoto-oireet ovat suhteellisen harvinaisia ja useimmiten sairaus on itsestään rajoittuva kuumetauti.Siksi se on erittäin tärkeää
dengue-kuumeen kliinisesti erottamiseksi CHIK-infektiosta.CHIK diagnosoidaan serologisen analyysin ja viruseristyksen perusteella hiirissä tai kudosviljelmässä.IgM-immunomääritys on käytännöllisin laboratoriotestimenetelmä.Chikungunya IgG/IgM -pikatesti hyödyntää sen rakenneproteiinista peräisin olevia rekombinanttisia antigeenejä, se havaitsee IgG/IgM anti-CHIK:n potilaan seerumista tai plasmasta 20 minuutissa.Testin voi suorittaa kouluttamaton tai
vähän koulutettua henkilökuntaa ilman raskasta laboratoriolaitteistoa.
PERIAATE
Chikungunya IgG/IgM+NS1-antigeenin pikatesti on lateraalivirtauskromatografinen immunomääritys.Testikasetti koostuu IgG/IgM-liuskasta ja NS1-liuskasta.
IgG/IgM-liuska:1) viininpunainen konjugaattityyny, joka sisältää Chikungunya-rekombinanttivaippaantigeenejä konjugoituna kolloidikullan (dengue-konjugaatit) ja kanin IgG-kultakonjugaattien kanssa, 2) nitroselluloosakalvoliuska, joka sisältää kaksi testinauhaa (G- ja M-vyöhykkeet) ja ohjauskaista (C-kaista).G-vyöhyke on esipäällystetty vasta-aineella IgG-anti-Chikungunya-viruksen havaitsemiseksi, M-vyöhyke päällystetään vasta-aineella IgM-anti-Chikungunya-viruksen havaitsemiseksi, ja C-vyöhyke on esipäällystetty vuohen anti-kanin IgG:llä.
NS1-liuska: 1) viininpunainen konjugaattityyny, joka sisältää hiiren anti-Chikungunya NS1 -antigeenia konjugoituna kolloidikullan kanssa (Chikungunya Ab -konjugaatit), 2) nitroselluloosakalvoliuska, joka sisältää testinauhan (T-vyöhyke) ja kontrollinauhan (C-vyöhyke).T-vyöhyke on esipäällystetty kanin anti-Chikungunya NS1-antigeenillä ja C-vyöhyke on esipäällystetty vuohen anti-hiiri-IgG-vasta-aineella.
IgG/IgM-liuska: Kun riittävä määrä testinäytettä annostellaan testikasetin näytekyvennykseen, näyte kulkeutuu kapillaaritoiminnan kautta kasetin poikki.IgG-anti-Chikungunya-virus, jos sitä on näytteessä, sitoutuu Chikungunya-konjugaatteihin.Immunokompleksi vangitaan sitten G-vyöhykkeelle päällystetyllä reagenssilla muodostaen viininpunaisen G-vyöhykkeen, joka osoittaa Chikungunya-viruksen IgG-positiivisen testituloksen ja viittaa äskettäiseen tai toistuvaan infektioon.IgM anti-Chikungunya-virus, jos sitä on näytteessä, sitoutuu Chikungunya-konjugaatteihin.Immunokompleksi vangitaan sitten M-vyöhykkeelle esipäällystetyllä reagenssilla muodostaen viininpunaisen M-vyöhykkeen, joka osoittaa Chikungunya-viruksen IgM-positiivisen testituloksen ja viittaa uuteen infektioon.Testijuovien (G ja M) puuttuminen viittaa negatiiviseen tulokseen. Testi sisältää sisäisen kontrollin (C-vyöhyke), jossa tulisi olla viininpunainen vyöhyke immunokompleksista, joka sisältää vuohen anti-kanin IgG/
kanin IgG-kulta-konjugaatti riippumatta värin kehittymisestä missä tahansa T-vyöhykkeessä.Muussa tapauksessa testitulos on virheellinen ja näyte on testattava uudelleen toisella laitteella.
NS1-liuska: Kun riittävä määrä testinäytettä annostellaan kasetin näytekyvennykseen, näyte kulkeutuu kapillaarivaikutuksella testikasetin poikki.Jos Chikungunya NS1 Ag on läsnä näytteessä, se sitoutuu Chikungunya Ab -konjugaatteihin.Immunokompleksi vangitaan sitten kalvolle esipäällystetyllä kanin anti-NS1-vasta-aineella muodostaen viininpunaisen T-vyöhykkeen, joka osoittaa Chikungunya Ag -positiivisen testituloksen.T-kaistan puuttuminen viittaa negatiiviseen tulokseen.Testi sisältää sisäisen kontrollin (C-vyöhyke), jossa tulisi olla viininpunainen vyöhyke vuohen anti-hiiri-IgG/hiiren IgG-kultakonjugaatin immunokompleksista riippumatta värillisen T-vyöhykkeen läsnäolosta.Muussa tapauksessa testitulos on virheellinen ja näyte on testattava uudelleen toisella laitteella.
