TESTIN YHTEENVETO JA SELITYS
Dengue-virukset, neljän erillisen virusserotyypin perhe (Den 1,2,3,4), ovat yksikantisia, vaipallisia, positiivisia RNA-viruksia.Viruksia levittävät päiväsaikaan purevien Stegemyia-perheen hyttyset, pääasiassa Aedes aegypti ja Aedes albopictus.Nykyään yli 2,5 miljardia ihmistä trooppisen Aasian, Afrikan, Australian ja Amerikan alueilla on vaarassa saada denguekuume-infektio.Arviolta 100 miljoonaa denguekuumetapausta ja 250 000 hengenvaarallista denguehemorragista kuumetta esiintyy vuosittain maailmanlaajuisesti1-3.
IgM-vasta-aineen serologinen havaitseminen on yleisin menetelmä denguevirusinfektion diagnosoimiseksi.Viime aikoina viruksen replikaation aikana vapautuneiden antigeenien havaitseminen tartunnan saaneesta potilaasta osoitti erittäin lupaavia tuloksia.Se mahdollistaa diagnoosin ensimmäisestä päivästä kuumeen alenemisen jälkeisestä päivästä 9. päivään, kun taudin kliininen vaihe on ohi, ja mahdollistaa näin varhaisen hoidon, joka sijoitetaan nopeasti4-. Dengue IgG/IgM -pikatesti on kehitetty havaitsemaan kiertävä dengue-antigeeni seerumista, plasmasta tai kokoverestä.Testin voi suorittaa kouluttamaton tai vähän koulutettu henkilökunta ilman laboratoriolaitteita.
PERIAATE
Dengue IgG/IgM -pikatesti on lateraalivirtauskromatografinen immunomääritys.Testikasetti koostuu: 1) viininpunaisen värisestä konjugaattityynystä, joka sisältää dengue-rekombinanttivaippaantigeenejä, jotka on konjugoitu kolloidikullan (dengue-konjugaatit) ja kanin IgG-kultakonjugaattien kanssa, 2) nitroselluloosakalvoliuskasta, joka sisältää kaksi testivyöhykettä (G- ja M-vyöhyke) ja kontrollinauhan.G-vyöhyke on esipäällystetty vasta-aineella IgG-anti-dengue-viruksen havaitsemiseksi, M-vyöhyke päällystetään vasta-aineella IgM-anti-dengue-viruksen havaitsemiseksi ja C-vyöhyke on esipäällystetty vuohen anti-dengue-IgG:llä.
Kun riittävä määrä testinäytettä annostellaan testikasetin näytekyvennykseen, näyte kulkeutuu kapillaaritoiminnalla kasetin poikki.IgG anti-dengue-virus, jos sitä on näytteessä, sitoutuu dengue-konjugaatteihin.Immunokompleksi vangitaan sitten G-vyöhykkeellä päällystetyllä reagenssilla muodostaen viininpunaisen värillisen G-vyöhykkeen, joka osoittaa dengueviruksen IgG-positiivisen testituloksen ja viittaa äskettäiseen tai toistuvaan infektioon.IgM anti-dengue-virus, jos sitä on näytteessä, sitoutuu dengue-konjugaatteihin.Immunokompleksi vangitaan sitten reagenssilla, joka on esipäällystetty M-vyöhykkeelle, muodostaen viininpunaisen värisen M-vyöhykkeen, joka osoittaa dengueviruksen IgM-positiivisen testituloksen ja viittaa uuteen infektioon.
Testijuovien (G ja M) puuttuminen viittaa negatiiviseen tulokseen. Testi sisältää sisäisen kontrollin (C-vyöhyke), jossa tulisi olla viininpunainen vyöhyke immunokompleksista, joka koostuu vuohen anti-kanin IgG/kanin IgG-kultakonjugaatista riippumatta värin kehittymisestä missä tahansa T-vyöhykkeessä.Muussa tapauksessa testitulos on virheellinen ja näyte on testattava uudelleen toisella laitteella.
